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测定意义:
FAS 是脂肪酸合成关键酶,催化乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 而生成长链脂肪酸。FAS 普遍 表达于各种组织细胞中,在哺乳动物肝、肾、脑、肺和乳腺以及脂肪组织中表达丰富。
测定原理:
FAS 催化乙酰 CoA、丙二酰 CoA 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+;NADPH 在 340nm 有吸收峰,而 NADP+没有;通过测定 340nm 光吸收下降速率,计算 FAS 活性。
试剂组成和配制:
试剂一:液体×1 瓶,-20℃保存。用前 1 d取出置于 4℃充分解冻后混匀。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 550 μL 试剂四,充分溶解。
试剂三:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 550 μL 试剂四,充分溶解。
试剂四:液体×1 瓶,4℃保存。
试剂五:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 1100 μL 试剂四,充分溶解。