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提取液:液体 60 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 20 mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 1 mL×1 支,4℃避光保存。
标准品:粉剂×1 支,10mg 还原型谷胱甘肽(GSH)。临用前加入 1.3mL 蒸馏水,浓度为 25µmol/mL,取一部分稀释成 0.5µmol/mL 待测,其余 4℃保存。
生物体内巯基主要包括谷胱甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质,而且参与活性氧清除,后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和 GSH 含量,能够间接测定蛋白质巯基含量。
巯基基团与 5,5’-二硫代-双-硝基苯甲酸(DTNB)反应,生成黄色化合物,在 412nm 处有最大吸收峰。