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测定意义
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理
碱性条件下,蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键,能将 Cu2+还原成 Cu+; 2 分子的 BCA 与 Cu+结合,生成紫色络合物,在 40-595nm 有吸收峰,562nm 处吸收峰最强。
试剂组成和配制
试剂 A:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂 B:液体 1mL×1 支,4℃保存。
标准蛋白:0.5mg/ml液体×1 支,4℃保存。
工作液配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×1mL),将试剂 A 和 B 按照 50:1 的比例混合,盖紧后充分混匀。