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提取液:液体 35mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加 10 mL 蒸馏水溶解。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃避光保存。临用前加入 10 mL 提取液,沸水浴中磁力搅拌溶解。试剂三:液体 50ml×1 瓶, 4℃保存。
试剂四:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
标准品:液体 1mL×1 支,0.25 μ mol/mL 标准酪氨酸溶液,4℃保存。
AKP 是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨酸蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。
在碱性条件下,AKP 水解酪蛋白生成酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在 680nm 有特征吸收峰,测定 680nm 吸光度增加速率,来计算 AKP 活性。