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产品内容:
酸性提取液:液体 25mL×1 瓶,4℃保存; 碱性提取液:液体 25mL×1 瓶,4℃保存; 试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 1.5mL×1 支,4℃保存
试剂三:粉剂×1 支,-20℃保存,用时加入 1.6mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周; 试剂四:粉剂×1 支,4 ℃保存,用时加入 1.9mL 双蒸水,混匀,4℃保存一周; 试剂五:液体 0.7mL×1 支,4 ℃保存;
试剂六:液体 15mL×1 瓶,4 ℃保存;
试剂七:自备。19.2mL 乙醇和 0.8mL 蒸馏水充分混合备用。
NAD 标准品:粉剂×1 瓶,-20℃保存。临用前加入 3mL 蒸馏水,即 1umol/mL,将其稀释为1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
NADH 标准品:粉剂×1 瓶,-20℃保存。临用前加入 2.8mL 蒸馏水,即 1umol/mL,将其稀释为1.25nmol/mL 的 NAD 标准溶液备用。
产品说明:
辅酶 I 包括还原型和氧化型两种形式,在生物氧化中起传递氢的作用。氧化型辅酶 I 又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)是脱氢酶的辅酶,它在糖酵解,糖异生,三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。中间产物会将脱下的氢递给 NAD,使之成为 NADH(还原型辅酶 I)。而 NADH 则会作为氢的载体,在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式,合成 ATP。。NAD(H)在机体内有重要的生理意义,与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。体内辅酶 I 含量降低会导致细胞损伤或衰亡。
分别用酸性和碱性提取液提取样品中 NAD+和 NADH,NADH 通过 PMS 的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在 570 nm 下检测吸光值,而 NAD+可被乙醇脱氢酶还原为 NADH, 进一步采用 MTT 还原法检测。